Грип - це гостре інфекційне захворювання, що протікає з вираженою загальною інтоксикацією і ураженням респіраторного тракту, збудниками якого є РНК-віруси сімейства Ortho-myxoviridae (рід Influenzavirus, типи А, В і С).
Збудниками ГРВІ є різноманітні численні віруси (більше 200), що викликають у людей катар верхніх дихальних шляхів з різним ступенем інтоксикації. Найбільш часто ГРВІ ви-викликають віруси парагрипу, аденовіруси, реовіруси, коронавіруси, риновіруси, ентеровіруси ,.
Лабораторна діагностика грипу та ГРВІ складається з експрес-методів, виділення вірусу, серологічного дослідження і методу генодиагностики (ПЛР) - схема 19.
Матеріалами для дослідження при грипі служать змиви з носоглотки, відділень-ється слизової оболонки носа, кро-вь, спинномозкова рідина, трупний матеріал. При ГРВІ, викликаних вірусами парагрипу, РС вірусом, корона-, рео- і аденовірусами, досліджуваним матеріалом є носоглоткові змиви і виділення слізіс-тій оболонки задньої стінки глотки, взяте ватним тампоном. Адено-, ентеро-і реовірус вдається виявити в крові, сечі, фекаліях, трупному матеріалі, а ентеровіруси в спін-номозговой рідини.
Схема 19. Вірусологічна діагностика грипу та ГРВІ
Експрес-діагностика спрямована навиявленіев досліджуваному матеріалі антигенів вірусів
Експрес-діагностика грипу та ГРВІ заснована на виявленні антигенів вірусів за допомогою прямої і непрямойРІФ. Позитивна реакція характеризується наявністю в клітинах епітелію скупчень антигену вірусу з яскравим зеленим світлом. Рідше застосовуються ронг і ІФА.
Досліджуваний матеріал, оброблений антибіотиками, вводять по 0,2 мл 10-11-ден-ним курячим ембріонам в порожнину амніону і аллантоиса. Після інкубації ембріонів протягом 3-4 днів при температурі 37 0 С, їх розкривають і аллантоісную рідина відсмоктують шприцом або пастерівською піпеткою, амниотическую - шприцом з короткою голкою. Індикацію вірусу грипу в зазначених рідинах проводять за допомогою РДА з 1% суспензією курячих еритроцитів. Індикацію вірусу в культурі клітин здійснюють по ЦПД, а також за допомогою РІФ і РГадс з еритроцитами морської свинки.
При ГРВІ виділення вірусів зазвичай проводиться на первинно-трипсінізірована і перещеплюваних культурах тканини різного походження. Наявність вірусу в клітинах культури тканини визначають по його цитопатичної дії, яке у вірусу парагрипу та РС вірусу проявляється утворенням синцития, а у аденовірусів і реовірусів - появою зернистості і включень в цитоплазмі.
Ідентифікацію вірусів грипу та ГРВІ виконують за допомогою РГГА, РСК, РН, ІФА, РТГадс.
Серологічний метод полягає у визначенні антитіл в парних сироватках крові хворих на грип за допомогою РСК, РГГА, ІФА, РРГ, РН. Наростання титру антитіл в 4 і більше разів підтверджує діагноз грипу.
Генодіагностика. Для діагностики грипу розроблена ПЛР.
Самостійна робота студентів
Вірусологічна діагностика грипу
1. Експрес-діагностика - виявлення антигену вірусу грипу в мазках-відбитках зі слизової оболонки порожнини носа хворого з підозрою на грип (пряма РІФ, демонстрація).
2. Вірусологічні методи:
· Індикація вірусу грипу на культурі клітин за допомогою реакції гемадсорбції (демонстрація);
· Індикація вірусу в аллантоісной рідини РКЕ за допомогою реакції гемаглютинації (самостійна робота);
· Ідентифікація вірусу за допомогою РГГА, поставленої з аллантоісной рідиною і грипом та діагностичними сироватками (H1N1, H2N2, H3N2 - демонстрація).
· Облік РГГА з парними сироватками крові хворого, визна-ділити наростання титру антитіл. (Демонстрація);
· Облік РП в гелі - з метою визначення антитіл до М-поліпептид вірусу грипу (демонстрація);
· Облік реакції радіального гемолізу з си-воротка крові хворого на грип (демонстрація).
4. Експрес-діагностика аденовірусної інфекції (виявлення специфічного антигену аденовірусів в клітинах епітелію слизової оболонки носоглот-ки за допомогою прямої РИФ - демонстрація).